Определение билирубина по иендрашику

Определение билирубина методом иендрашека

Определение билирубина по иендрашику

Значение метода: Для дифференциальной диагностики желтух необходимо определить, за счет какой фракции возникает билирубинемия.

Пигменты Желтухи
Механическая Острый гепатит Гемолитическая
Свободный билирубин крови Не изменен Незначительно повышен Резко повышен
Связанный билирубин крови Резко повышен Значительно повышен Незначительно повышен
Билирубин мочи Значительно повышен Незначительно повышен Не изменен
Уробилин мочи Не изменен или снижен Значительно повышен Резко повышен
Стеркобилин кала Снижен Не изменен или снижен Резко повышен
Органоспецифические ферменты Умеренная гиперферментемия Резкая гиперферментемия на ранних стадиях Не изменены

Принцип метода: при добавлении кофеинового реактива к сыворотке весь билирубин переходит в диссоциированное состояние и дает розово-фиолетовое окрашивание с диазореактивом. Без добавления кофеинового реактива окрашивание с диазореактивом дает только холебилирубин. По интенсивности окраски определяют светопоглащение.

Ход работы:

Реактивы   Пробирка 1 Пробирка 2   Пробирка 3  
Общий билирубин Холебилирубин Контроль
Сыворотка крови 0,5мл 0,5мл 1,0 мл
Физ. раствор 1,75мл 0,5 мл
Кофеиновый реактив   1,75мл 3,5 мл
Диазосмесь 10 мл диазо 1 0,3 мл диазо 2 0,25мл 0,25мл

Для развития окраски общего билирубина пробу оставляют на 20 минут. Холебилирубин колориметрируют через 10-15 минут после добавления смеси. При более длительном стоянии в реакцию вступает гембилирубин. Обе пробирки колориметрируют против контроля в кюветах на 0,5 см с зеленым светофильтром. Количество гембилирубина определяют по разности общего и холебилирубина.

Норма: общий 4,2-20,5 мкМоль/л, холебилирубин 1,0-5,2мкМоль/л.

Гембилирубин 3,2-15,4 мкМоль/л.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №20

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛЬЦИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ТИТРОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ С ПРИМЕНЕНИЕМ МУРЕКСИДА

Значение метода: Определение Са крови имеет большое значение (клиническое). Са определяют при рахите, при спазмофилии, при костных заболеваниях, при некоторых заболеваниях почек. При рахите также определяют коэффициент (Са/Р), в норме он равен 1,9-2 а при рахите увеличивается до 3 и более.

Принцип метода: мурексид образует с ионами Са в щелочной среде комплексное соединение, окрашенное в красно- фиолетовый или бледно-розовый цвет (в зависимости от концентрации). При титровании раствором более сильного комплексо-образователя трилона Б, этот комплекс разрушается, что приводит к изменению окраски, свойственной свободному мурексиду (бледно-сиреневой).

Ход работы: в стаканчик вносят 50 мл дистил. воды, 10 капель 9н р-ра NаОН и прибавляют несколько крупинок мурексида. Сразу появляется бледно-сиреневое окрашивание, обусловленное свободным мурексидом.

Приблизительно половину раствора переливают в другой чистый стаканчик и эта часть служит эталоном окраски свободного мурексида. К оставшейся части р-ра добавляют 1мл сыворотки, что приводит к появлению бледно- розового окрашивания, обусловленного образованием кальциево-мурексидного комплекса.

Раствор немедленно титруют трилоном Б до возращения прежней окраски индикатора. Конец титрования устанавливают путем сопоставления опытной и контрольных проб.

С тр.Б х V тр. Б 3,6мэкв/л Vтр Б

С Са= —————————– = ———————

Vсыв 1мл

Vтр.Б- Обьем трилона Б, пошедший на титрование.

Норма: Са=4,5-6,0 мэкв/л

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №21

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКОГО ФОСФОРА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ.

Значение метода: Гиперфосфатемия встречается при почечной недостаточности, гипопаратиреозе, акромегалии, при гипервитаминозе Д, костных заболеваниях, туберкулезе, диабете, кетозе, повышенной мышечной работе, при молочной диете. Гипофосфатемия наблюдается при гиперпаратиреозе, остеомаляции, пеллагре, длительном лечении инсулином и хлористым кальцием, при нарушении всасывания фосфатов, Д- авитаминозном рахите.

Принцип метода: Неорганический фосфор при взаимодействии с (NН4)2МоО4 образует фосфорно-молибденовую кислоту, которая восстанавливается аскорбиновой кислотой до синего фосфорно-молибденового комплекса. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации неорганического фосфора.

Ход работы: К 4мл. дист.воды прилить 1мл сыворотки и 5мл трихлоруксусной кислоты (ТХУ), через 10 минут фильтруют. К 5мл фильтрата добавляют 1мл (NН4)2МоО4 и 1,8мл дистил.воды,

0,2 мл аскорбиновой кислоты. Через 20 минут колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром относительно дист. воды. Количество неорганического фосфора определяют по калибровочной кривой. Норма: 1,8- 2,4 мэкв/л.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №22

Качественные реакции на неорганические и органические составные части мочи.

Просмотров 1273 Эта страница нарушает авторские права

Источник: //allrefrs.ru/2-12880.html

Количественное определение билирубина и его фракций в сыворотке крови по методу Иендрашика, Клеггорна и Гроффа

Определение билирубина по иендрашику

Задание 1.Определить содержание общего, связанного и свободного билирубина в сыворотке крови методом Иендрашика, Клеггорна и Гроффа.

Принцип. Метод базируется на способности связанной и диссоциированной формы свободного билирубина образовывать при взаимодействии с диазофенилсульфоновой кислотой азобилирубин розово-фиолетового цвета.

Свободный билирубин переводится в растворимое диссоциированное состояние кофеиновым реактивом, благодаря чему в этой пробе определяется общий билирубин.

По разности между общим и связанным билирубином находят концентрацию свободного.

Ход работы. В три пробирки вносят, в соответствии с таблицей, необходимые ингредиенты и тщательно перемешивают.

Реактивы Общий билирубин, мл Связанный билирубин, мл Контроль, мл
Сыворотка 0,5 0,5 0,5
Кофеиновый реактив 1,75 1,75
Раствор натрия хлорида 1,75 0,25
Диазореактив 0,25 0,25

При определении общего билирубина пробы оставляют стоять на 20 мин для развития окраски, а связанного – на 5-10 мин (при более продолжительном стоянии в реакцию вступает свободный билирубин). По окончании указанного времени фотометрируют каждую пробу против воды на ФЭК при длине волны 520-560 нм (зеленый светофильтр) в 5 мм кювете.

Из полученных экстинкций общего и связанного билирубина отнимают экстикцию контрольной пробы (контроль на мутность сыворотки) и находят содержание общего и связанного билирубина (в мкмоль/л) по калибровочному графику. Свободный билирубин рассчитывают по разности между количеством общего и связанного.

Рассчитывают содержание общего билирубина и его фракций в сыворотке крови и делают вывод о причинах возможных отклонений этих показателей.

Клинико-диагностическое значение. В норме содержание общего билирубина в сыворотке крови составляет 4,0-21,0 мкмоль/л; из этого количества 75% приходится на долю свободного билирубина (6,0-15,0 мкмоль/л) и 25% на долю связанного (2,0-5,0 мкмоль/л).

К основным факторам, которые вызывают нарушение обмена жёлчных пигментов, принадлежат: повышенный гемолиз эритроцитов, нарушение синтеза билирубинглюкуронидов, нарушение выделения связанного билирубина из гепатоцитов в жёлчные капилляры (деструкция гепатоцитов), нарушение жёлчевыделения вследствие обтурации внепечёночных жёлчевыводящих путей.

Паренхиматозная желтуха возникает при гепатитах, циррозах печени и характеризуется резким повышением содержания связанного билирубина в крови. В печени снижается образование билирубинглюкуронида, вследствие этого содержание свободного билирубина в крови также увеличивается.

Гемолитическая желтуха возникает при усиленном гемолизе эритроцитов, что приводит к усилению образования свободного билирубина, так как печень не успевает его связывать.

Увеличение концентрации связанного билирубина в случае обтурационной желтухи обусловлено перенаполнением жёлчных путей вследствие закупорки, разрыва и в дальнейшем переходе компонентов жёлчи в кровь; при этом в крови накапливается связанный билирубин (гипербилирубинемия), из мочи исчезает уробилиноген, однако вследствие билирубинурии она приобретает тёмную окраску, а из кала исчезает стеркобилин. В клинико-биохимических лабораториях проводят определение содержания билирубина и его фракций для дифференциальной диагностики желтух.

ЛИТЕРАТУРА

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 462-467.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 577-584.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 562-566.

4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 506-508, 561-565.

5. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 645-655.

6. Лабораторні та семінарські заняття з біологічної хімії: Навч. посібник для студентів вищих навч. закл. / Л.М. Вороніна, В.Ф. Десенко, А.Л. Загайко та ін. – Х.: Вид-во НФаУ; Оригінал, 2004. – С. 209-212.

ЗАНЯТИЕ 7

Тема: Биохимия почек и мочи. Физико-химические свойства и химический состав мочи в норме. Биохимическое исследование мочи.

Актуальность. Почки – один из важнейших органов, основное назначение которого заключается в поддержании динамического постоянства внутренней среды организма.

Почки принимают участие в регуляции водно-электролитного баланса, кровяного давления, поддержке кислотно-щелоч-ного состояния, осмотического давления жидкостей организма; стимуляции эритропоэза и др. Почки вырабатывают мочу из компонентов плазмы крови. С мочой выделяется до 150 разных веществ.

В суточной моче содержится в среднем около 40 г органических веществ и приблизительно 20 г неорганических. Биохимическое исследование мочи играет важную роль в клинике для диагностики и прогноза заболевания, контроля эффективности лечения.

Цель. Ознакомиться с основными физико-химическими свойствами мочи (диурез, рН, плотность, цвет, прозрачность, запах) и химическим составом нормальной мочи.

Ознакомиться с методами клинического и биохимического анализа мочи.

Запомнить некоторые физико-химические константы и биохимические показатели мочи в норме с целью использования их для диагностики заболеваний, правильной оценки отклонений от нормы.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ

1. Функции почек и особенности обмена веществ в них.

2. Биохимические механизмы регуляции функции почек.

3. Общие свойства и химический состав нормальной мочи. Значение исследования в клинике.

4. Органическое и неорганическое вещества нормальной мочи. Их изменения в зависимости от возраста.

5. Физико-химические показатели мочи: диурез, относительная плотность, рН, запах, цвет, прозрачность. Значение их исследования. Возможные отклонения от нормы.

6. Клинико-диагностическое значение количественного и качественного анализа мочи.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1. У спортсмена, который находился на диете с большим количеством белков, установлена кислая реакция мочи. Наличие каких веществ приводит к таким изменениям?

А.Хлориды и фосфаты. С.Фосфаты и сульфаты.В. Хлориды и сульфаты. D. Ураты и сульфаты.Е. Ураты и хлориды.

2. Прозрачность мочи является одним из параметров, которые оцениваются при её анализе. С наличием каких веществ может быть связано помутнение мочи, имеющей щелочную реакцию?

А. Фосфата кальция. В. Сульфата магния.С. Уратов.D. Хлоридов.Е. Солей аммиака.

3. Почки выполняют все функции, кроме:

А. Выделяют конечные продукты обмена.В. Регулируют водно-солевой обмен.С. Поддерживают осмотическое давление.D. Регулируют артериаль- ное давление крови.Е. Раскладывают мочевину на СО2 и Н2О.

4. Органоспецифическим ферментом почек является:

А. Лактатдегидрогеназа. В. Сукцинатдегидрогеназа.С. Аспартатаминотрансфераза.D. Трансамидиназа.Е. Креатинфосфокиназа.

5. В результате фильтрации плазмы крови в первичную мочу переходят все вещества, кроме:

А. Моносахаридов (глюкозы и фруктозы). В. Мочевины и мочевой кислоты.С. Низкомолекулярных белков.D. Креатина и креатинина.Е. Средне- и высокомоле- кулярных белков.

6. Поддержание постоянства рН в организме с помощью почек осуществляется в процессе реабсорбции ионов Na+ и секреции Н+. В основе их действия лежат все перечисленные химические процессы, за исключением:

A. Реабсорбция Na+ во время преобразования двузамещённых фосфатов
в однозамещённые.

B. Избирательное всасывание ионов Na+ в клетках канальцев взамен на
ионы Н+, идущих в просвет канальцев.

C. Диссоциация Н2СО3 на НСО3- и Н+, последний выводится из организма. D.Задержке ионов Na+ способствуют реакции образования аммиака и
использование его для нейтрализации кислых метаболитов.

E. Выведение мочевины с мочой.

7. Для диагностики заболевания мутную мочу с щелочной реакцией подкислили и подогрели. При этом осадок исчез. Чем обусловлена мутность мочи?

А. Слизь из мочевыводящих путей. В. Микрофлора, которая раскладывает мочевину с образованием аммиака.С. Гной из уретры.D. Белок почечного проис- хождения.Е. Фосфаты кальция и маг- ния, ураты.

8. Какой из физико-химических показателей мочи зависит от диуреза?

А. Цвет. В. рН. С. Относительная плотность.

D. Запах. Е. Прозрачность.

9. Какие из приведенных показателей рН и относительной плотности мочи взрослого человека отвечают норме?

А. рН=4,8; плотность 1,001. В. рН=8,0; плотность 1,040.С. рН=8,5; плотность 1,029.D. рН=3,5; плотность 1,020.Е. рН=6,0; плотность 1,021.

10. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого наблюдается прекращение выделения мочи?

А. Энурез. В. Олигурия. С. Анурия. D. Никтурия. Е. Дизурия.

11. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого суточный диурез составляет 500 мл?

А. Анурия. В. Полиурия. С. Никтурия. D. Олигурия. Е. Поллакиурия.

12. аммиака в моче является важным показателем кислотно-щелочного состояния организма; количество аммиака повышается как при респираторном, так и метаболическом ацидозе. Это связано со стимуляцией при ацидозе синтеза в клетках эпителия почечных канальцев ферментов:

А. Глутаминазы. В. Цикла Кребса.С. Карбоангидразы.D. АТФ-азы.Е. Гиалуронидазы.

13. Больной, 45 лет, жалуется на неутолимую жажду, потребление большого количества жидкости (до 5 л), выделение значительного количества мочи (до 6 л в сутки). Концентрация глюкозы в крови составляет 4,4 ммоль/л, уровень кетоновых тел не повышен. Моча неокрашена, удельный вес 1,002; сахар в моче не определяется. Дефицит какого гормона может привести к таким изменениям?

A. Глюкагона. B. Альдостерона. C. Инсулина. D. Вазопрессина.

14. При лабораторном исследовании ребёнка выявлено повышенное содержание в моче лейцина, валина, изолейцина и их кетопроизводных. Моча имеет характерный запах кленового сиропа. Недостаточностью какого фермента вызваны данные изменения?

А. Дегидрогеназы α-кетокислот. В. Аминотрансферазы.С. Глюкозо-6-фосфатазы.D. Фосфофруктокиназы.Е. Фосфофруктомутазы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА



Источник: //infopedia.su/1x80da.html

Билирубин: виды, анализ крови, высокий и низкий уровень билирубина

Определение билирубина по иендрашику

Билирубин – это то, с чем связывают явное изменение кожных покровов, слизистых тканей, белков глаз. Он влияет на оттенок мочи, кала и сигнализирует о болезни печени. Стоит заметить, что многие впервые сталкиваются дисфункцией в первые дни после рождения, некоторые узнают о проблеме при серьезных патологиях органа, кому-то не избежать неблагополучной наследственности.

Развитие патологического процесса, следует купировать, так как токсичность пигмента, губительно сказывается на нервных клетках.

Билирубин — что это такое?

Билирубин – это пигмент желчи, и ему свойственно проявляться при деструкции завершивших свою жизненную роль эритроцитов.

Селезенка, разрушив окончательно форменный элемент крови, портальными венами переносит вещество в печень, где оно максимально обезвреживается, становится менее токсичным.

После всех этапов трансформации, ему свойственно устраняться вместе с желчью по протокам в двенадцатиперстную кишку, при этом меняя ее оттенок.

При сбое процесса преобразования, визуально можно отметить внешние патологические признаки у пациента. Преимущественно, проявление патологии – характерный желтый цвет тканей. Если углубиться в рассмотрение клинической картины всех видов желтухи, можно получить представление о возможных причинах болезни.

Виды билирубина

Ежедневно организм человека синтезирует различные виды билирубина. Его объемы достигают 300 мг, большая часть которого появляется благодаря непрерывному распаду старых эритроцитов.

В ходе проведения диагностического исследования, определяют три типа пигмента:

  1. Весь объем вещества в плазме больного – общая фракция.
  2. Непрямой билирубин, не растворяемый в воде – косвенный либо неконъюнгированный. Растворимым он становится после попадания в печеночные клетки с кровью.
  3. Конъюгированный пигмент либо прямой – синтез билирубина клетками печени из непрямого.

Определить концентрацию общего, прямого и непрямого билирубина можно при сдаче анализов. Показатели косвенного пигмента, вычисляются с учетом цифр, полученных после исследования материала.

При патологиях, связанных с дисфункцией печени, важно отслеживать баланс веществ между собой, а также их общее увеличение. Повышенная концентрация непрямого (свободного) билирубина, сигнал организма о необходимости нейтрализации его опасного, токсического воздействия.

Чтобы обезопасить и устранить пигмент, его следует перевести в растворимые формы.

Исследование крови на билирубин

Чтобы узнать точное количество связанного билирубина и непрямого, делают забор крови либо мочи. В ходе анализа на биохимию, выявляют пигмент и его прямую связанную форму.

Зная всего несколько значений, высчитывают несвязанный билирубин в крови.

Ведущий специалист, в зависимости от симптоматики, назначает один из выше перечисленных анализов, так как они разные, следует детально изучить направление.

Единица измерения пигмента – мкмоль/литр. Срочные результаты при экстренной необходимости можно получить через пару часов, но обычно лаборанты предоставляют данные через день, два.

Оснащенность лабораторий и новые технологии, дают возможность узнать концентрацию вещества в плазме, до десятых долей (микромоли). По конечным данным обнаруживают патологические изменения в печени, даже при отсутствии клинических признаков. При визуализации желтизны в тканях, исследование способствует ускоренному выявлению негативного фактора и способов устранения проблемы.

Стандартный анализ мочи, позволяет выявить пигмент. При необходимости, врач может получить срочный ответ либо за один – два дня.

Для получения достоверного результата, применяют высокоточные анализаторы, что существенно снижает вероятность ошибок по причине «человеческого фактора».

Исход анализа – не является поводом для установки диагноза, но он вполне оправдан для отслеживания динамики течения болезни, состояния пациента.

Когда назначается анализ?

Врачи часто дают назначение на обследование при подозрении на инфекции либо патологические изменения в печени. Также поводом для определения концентрации пигмента может быть:

  • профилактический контроль;
  • биохимия расширенного типа;
  • жалобы пациента на спазмы в правом подреберье;
  • подозрения на патологические изменения в печени;
  • интоксикации, гемолитическая анемия;
  • желтизна тканей;
  • холецистит, панкреатит;
  • новообразования в печени;
  • фиброз, цирроз.

Общие анализы мочи, являются дополнительными, уточняющими, скрининговыми и обычно они показаны при тех же болезнях, что и анализ крови.

Подготовительные приготовления к анализу

Для получения точных показателей, к процедуре сдачи анализов следует подойти со всей ответственностью.

Сдача крови:

  1. Исследование проводят из проб, отобранных на голодный желудок. «Натощак» — когда интервал от приема пищи до анализа составляет 8 часов.
  2. Все напитки, кроме чистой воды – пища, следовательно, придется ограничиться водой.
  3. За пару дней до исследований, стоит отказаться от спиртосодержащих напитков, вредной пищи.
  4. Даже заядлым курильщикам, необходимо воздержаться от табачных изделий за 30 – 60 мин до назначенного времени.
  5. Анализ крови на билирубин, требует пребывания в спокойном физическом и психоэмоциональном состоянии.
  6. Перед исследованием, прием медикаментов, по согласованию с врачом, следует отменить за декаду.
  7. После рентгена, диагностический метод необходимо перенести на некоторое время.
  8. Для оценки показателей в корректной форме, следует соблюдать постоянство при выборе лаборатории.

Как правильно сдать мочу:

  1. Мочу собирают в специальную, стерильную емкость.
  2. Анализ не сдают при менструации.
  3. Предварительно необходимо исключить овощи и фрукты, меняющие цвет мочи.
  4. Перед сбором материала, проводят гигиену половых органов.
  5. Начальную порцию мочи выпускают в унитаз, после чего собирают 50 мл в резервуар.

На достоверность анализа могут влиять:

  • беременность;
  • диета;
  • длительный голод.

При сдаче анализов в материал для исследования не должны попасть бактерии.

Нормы билирубина у взрослых

Референтное значение общего билирубина у взрослого человека без патологических изменений в плазме крови, варьирует в пределах 8 – 20, 5 мкмоль/л по Иендрашику. При этом непрямой —составляет 75% от общего, прямой – не более 25%.

Общий билирубин, мкмоль/лКонъюгированный пигмент, мкмоль/лНеконъюгированный билирубин, мкмоль/л
Мужчины3, 4 – 17, 13, 4 – 16, 51, 7 – 5, 1
Женщины

Предельные границы нормального билирубина у мужчин и женщин не имеют отличий.

Билирубин у беременных

Норма билирубина в крови у женщин в период вынашивания плода, может повышаться либо понижаться – не соответствовать референтным значениям, что является нормой. Концентрация пигмента может возрастать с увеличением срока и ростом плода.

Общий билирубин, мкмоль/лКонъюгированный билирубин, мкмоль/лНеконъюгированный билирубин, мкмоль/л
Первый триместр5 – 21, 21 – 8,93, 9 – 21, 0
Второй триместр5 – 21, 21 – 10, 14, 5 – 22, 8
Третий триместр5 – 21, 20 – 11, 24, 9 – 23, 9

При отклонениях от нормы билирубина в крови, в какую-либо сторону в незначительных пределах, речь об угрозе плоду и матери не идет, но при существенных показателях роста вещества, стоит отнестись к проблеме со всей серьезностью. Причиной патологических значений может быть холецистит, гепатит, анемия.

Билирубин у новорожденных

Норма билирубина у новорожденных, несколько отличаются от значений взрослого, здорового человека.

Общий билирубин, мкмоль/лКонъюгированный билирубин, мкмоль/лНеконъюгированный билирубин, мкмоль/л
Новорожденные 1–3 дня жизни23, 1 — 19023, 5 – 179, 80, 5 – 10, 2
Малыши 3–6 дней от роду28 — 21027 – 197, 61 – 12, 4
Дети в 1 месяц и до 14 лет3, 5 – 20, 4верхняя граница – 16, 5до 5, 1

На первом году жизни, исследования на билирубин у детей, необходимо проводить один раз в пару месяцев. Решение о частоте сдачи анализов принимает педиатр. В год определение содержания вещества является обязательным.

Негативные факторы, влияющие на повышение или понижение пигмента

Высокий билирубин, это следствие патологического процесса в организме и стоит более детально рассмотреть негативные факторы. Уровень пигмента в плазме растет в верх при закупорке оттока желчи, что в последующем купирует поступление вещества в кишечник. Стоит более детально изучить причины дисфункции.

Болезни печени

Врачи ведут тщательный контроль за уровнем пигмента при достаточно серьезных патологиях печени:

  • А, В — гепатиты, мононуклеоз;
  • лептоспироз, бруцеллез;
  • гепатиты аутоиммунной природы;
  • токсические гепатиты;
  • рак;
  • холелитиаз;
  • медленный аутоиммунный билиарный цирроз;
  • синдром Ротора, Дабина-Джонса.

Значения, когда билирубин выше нормы объясняются неполноценностью оттока желчи.

Гемолитическая анемия

Нарушения, влияющие на повышение непрямого пигмента:

  • синдром Жильбера, Дрискола;
  • сепсис, малярия;
  • гемолитические анемии (врожденной этиологии);
  • змеиные укусы, интоксикации от химических веществ,
  • медикаментов;
  • системные, аутоиммунные гемолитические анемии.

Причин повышенного билирубина, много и все они вызваны чрезмерным разрушением эритроцитов.

Желтуха

Повышенная билирубинемия — патологическое изменение, проявляющееся при избытке вещества в плазме крови.

Из-за химической связи с белками, синтезируются соединения желтого цвета, что в последующем окрашивает ткани в насыщенный, желтый цвет.

Так как белковая оболочка глазного яблока включает в себя много эластина, по сути родственного билирубину, при желтухе, именно склеры в первую очередь меняют цвет на желтый. Лишь через промежуток времени изменяется оттенок кожи.

Наследственность

Желтизна тканей и повышение свободного пигмента в сыворотке, может объясняться синдромом Жильбера — не часто встречающимся наследственным заболеванием.

Болезнь набирает сил из-за снижения активности печеночного фермента уридиндифосфат-глюкуронилтрансферазы. У носителей гомозиготных мутации, выявляют высокий начальный уровень пигмента с характерными клиническими изменениями.

Стоит заметить, что у гетерозиготных форм, заболевание протекает в латентной форме.

Холестаз

Высокий билирубин у женщин, частое явление на поздних сроках беременности — холестаз. Под давление плода, замедляется либо происходит полное прекращение выделения желчи. Проблема отличается сложностью установки диагноза.

Пониженный билирубин

Низкий билирубин — редкое явление. Причины могут быть в патологических факторах либо некорректная сдача анализов. Также на результат влияет качество питания человека либо курс терапии медикаментозными препаратами. Обычно пониженный билирубин объясняется несерьезным отношением к требованиям к сдаче анализов.

Повышенный билирубин

При расшифровке данных выписки, важно точно определить, какой именно билирубин повышен в крови. Непрямой пигмент повышается при ускоренном разрушении гемоглобина. Причиной такого явления чаще всего является резус-конфликт, интоксикация организма, патологические изменения в структуре крови.

Прямой билирубин повышается, когда циркуляция желчи по какой-либо причине нарушается (камни, отеки, спазмы).

Если диагностирован цирроз либо болезни разрушающие клетки печени, отмечают повышение всех показателей.

Уровень билирубина выше 30 мкмоль/литр, приводит к проявлению явных клинических признаков – меняется цвет кожи, слизистых тканей.

Как понизить билирубин?

Если высокий билирубин в крови, то на это есть достаточно серьезные причины. Чтобы снизить показатели, необходимо устранить негативный фактор, так как концентрация пигмента, это следствие патологии.

Чтобы понизить концентрацию до пределов нормы необходимо:

  • принимать медикаментозные препараты при гепатите либо гемолитической анемии;
  • приложить усилия для нормализации функции печени (гепатопротекторы);
  • стимулировать синтез желчи, вывод ее из организма без задержек;
  • провести корректирование пищевых пристрастий, соблюдать диету, отказаться от спиртного;
  • проводить очищение желудочно-кишечного тракта и желчевыводящих путей.

Сегодня особенной популярностью пользуются альтернативные методы лечения.

Лекарственными сборами и домашними настойками, можно результативно поддержать «фильтр» организма, настроить пищеварительную функцию, облегчить функциональную деятельность желчного пузыря.

В средствах нетрадиционной медицины, чтобы снизить билирубин в домашних условиях, широко применяют сборы трав. На основе расторопши изготавливают гомеопатические составы, а также отменно зарекомендовал себя отвар из листьев березы.

При диагностировании желтухи у новорожденных, чтобы быстро понизить билирубин, малыша определяют в специальную камеру под лампу. Под действием лучей, вещество видоизменяется и устраняется из организма.

Стоит заметить, что повышение концентрации билирубина, может негативно отразиться на нервной системе и качестве слуха новорожденного, следовательно, меры по исправлению ситуации следует принимать без промедлений.

Заключение

Получив на руки результаты анализов с показателями билирубина в крови, не стоит паниковать и устанавливать себе диагноз самостоятельно. Лучшим решением будет посещение врача, прояснение реальной ситуации и разработка совместной лечебной тактики при необходимости. Только специалист может назначить адекватное лечение с учетом особенностей случая.

(2 5,00 из 5)
Загрузка…

Источник: //kardios.ru/krov/bilirubin/

Определение билирубина по иендрашику

Определение билирубина по иендрашику

В незначительном количестве билирубин может быть обнаружен в сыворотке крови у здоровой лошади. В значительных количествах билирубин появляется только при патологических процессах.

Билирубин образуется из гемоглобина распавшихся эритроцитов. В результате распада образуется два пигмента—гемосидерин, содержащий железо, и гематорфирин. В клетках ретикуло-эндотелиальной системы из этих пигментов образуется билирубин, связанный с глобулинами.

Этот билирубин некоторое время циркулирует в крови, окрашивая сыворотку в желтоватый цвет. Затем он захватывается купферовскими клетками печени и свобождается от белка, после чего становится полноценным билирубином, который поступает в кишечник.

Часть пигмента в виде уробилина всасывается в кровь, а часть в виде стеркобилина выводится с фекалием.

При патологии возможно скопление чистого билирубина в крови и выведение его через почки с мочой. Следует отметить, что билирубин, связанный с белком, через здоровые почки не проходит, но его выделение возможно при нефритах.

Билирубин, связанный с белком, называется билирубином, не проведенным через печень. Повышенное количество такого билирубина в крови отмечается при гемолитических желтухах. Чем значительнее гемолиз эритроцитов, тем больше содержится в сыворотке крови билирубина, не проведенного через печень.

Билирубин, не связанный с глобулинами, называется проведенным через печень. Значительное количество такого билирубина в сыворотке крови можно обнаружить при различного рода препятствиях к оттоку желчи в кишечник. Желчь застаивается в выходящих путях и затем начинает поступать в кровь.

Определение билирубина в сыворотке крови является, следовательно, надежным методом дифференциации желтух.

Ван-ден-Берг, разработавший метод дифференциации желтух, различает два вида реакции на билирубин: прямую и непрямую.

Прямой реакцией называется такая, которая возникает после добавления рабочего реактива. Окрашивание жидкости может иметь вариации по времени и интенсивности окраски.

Различают реакции прямую, быструю или моментальную, когда жидкость окрашивается сейчас же после добавления реактива; прямую двухфазную, если после добавления реактива жидкость окрашивается очень слабо, а затем окрашивание становится все более и более интенсивным, и прямую замедленную, когда окрашивание появляется спустя 10—15 минут.

Прямая реакция получается при наличии в крови билирубина, проведенного через печень. Прямая, быстрая реакция отмечается при механической желтухе, возникающей при закупорке желчного протока камнями, паразитами.

Прямая двухфазная реакция бывает при желтухах смешанного характера, а прямая замедленная—при катаральное желтухе с нарушением функции печеночных клеток.

Непрямая реакция возникает после добавления спирта. Она выявляет билирубин, не проведенный через печень и связанный с глобулиновой фракцией. Спирт коагулирует белок и тем самым разрушает связь билирубина с глобулинами и создает нормальные условия для хода реакции.

Непрямая реакция указывает на гемолитическую желтуху, когда билирубина бывает больше 3 мг% в 100 мл сыворотки крови.

Для определения билирубина в сыворотке крови рекомендуется несколько методов. По точности результатов на первом месте стоит колориметрический метод Ван-ден-Берга.

Он применяется чаще при выполнении научных работ, так как требует лабораторных условий, химически чистых реактивов и колориметра Аутенрита или Дюбоска. В клинической практике используются другие методы, например Бакальчука и Херцфельда.

Для ориентировочных исследований может быть использован метод Мауленграхта в модификации Синева для животных.

Способ Ван-ден-Берга. Для постановки реакции необходимо иметь колориметр Аутенрита или Дюбоска, диазореактивы Эрлиха, 96%-ный спирт и стандартный раствор.

Рабочая смесь готовится из разных диазореактивов. Первый реактив— сульфаниловой кислоты 1,0, соляной кислоты 15 мл (уд. вес 1,125) и дистиллированной воды 1 литр. Второй—азотистокислого натрия 0,5 и дистиллированной воды 100 мл. Рабочий реактив готовится в соотношении 8 мл первого реактива и 0,25 мл второго.

Наилучшим и наиболее употребительным является кобальтовый стандарт. В 100 мл дистиллированной воды растворяют 2,161 г сернокислого кобальта, предварительно освобожденного от кристаллизационной воды путем нагревания. Можно также взять 3,92 г кристаллического CoS04*7H20. Этот раствор соответствует раствору билирубина 1:200 000 (0,5 мг%).

Раствором такой же окраски, но менее стойким, является раствор, полученный следующим образом: 1) в колбочке емкостью в 100 мл, растворяют 0,1508 железо-аммиачных квасцов в небольшом количестве воды, прибавляют затем 50 мл соляной кислоты (удельный вес 1,19) и доводят после этого водой уровень жидкости до метки 100.

Из этого основного раствора, имеющего 1/320 нормальности, приготовляют рабочий реактив (1/8000). В колбу емкостью 250 мл вносят 10 мл основного раствора, смешивают с 25 мл соляной кислоты и доливают до 250 мл водой.

Рабочий реактив годен для работы в течение нескольких месяцев; 2) 10%-ный раствор роданистого калия или аммония.

Приготовление стандартного раствора. К 3 мл рабочего реактива прибавляется в делительной воронке 3 мл 10%-ного раствора роданистого калия и 12 мл сернокислого эфира.

При постоянном охлаждении делительной воронки под краном, жидкость смешивают до тех пор, пока роданистое железо не будет экстрагировано эфиром. Этим розовым эфирным раствором роданистого железа и пользуются для сравнения в качестве стандарта.

Раствор нужно предохранять от испарения. По своей окраске стандарт соответствует 0,5 мг билирубина на 100 мл сыворотки крсви.

Техника исследования сводится к следующему: К 2 мл испытуемой сыворотки добавляют 4 мл спирта и смесь центрифугируют в течение 20 минут; 1 мл раствора переносят в клин колориметра Аутенрита или стаканчик колориметра Дюбоска и прибавляют 0,5 мл рабочего реактива.

Наполнив затем второй стаканчик колориметра кобальтовым стандартом или раствором роданистого железа, сравнивают окраску обоих растворов и устанавливают, на каких делениях шкалы получается идентичное окрашивание в обоих стаканчиках. Расчет производится по формуле:

С2= C2*H2*5 / H1 мг в 100 мл сыворотки.

C1—концентрация исследуемой жидкости;

С2—концентрация стандартного раствора;

Н1—высота столба исследуемой жидкости;

H2—высота стандарта.

При расчетах необходимо учитывать степень разведения сыворотки.

При наличии билирубина получается розовое окрашивание, но нужно учесть что окрашивание зависит от реакции среды. В нейтральной среде окрашивание получается розовое, в слабокислой—эта окраска имеет слабосиневато-фиолетовый оттенок. Такая же окраска получается и при медленном проведении пробы.

Метод Бакальчука. Для постановки пробы используются диа-зореактивы (см. метод Ван-ден-Берга), из которых готовится рабочая смесь в пропорции: 10 мл реактива № 1 и 0,3 мл реактива № 2.

Для определения билирубина берется пять пробирок; в них наливают по 0,5 мл физиологического раствора, а затем в первую вносят 0,5 мл испытуемой сыворотки.

Перемешав жидкость, отсасывают при помощи пипетки 0,5 мл смеси и переносят ее во вторую пробирку. Из второй после перемешивания смеси переносят 0,5 мл в третью и т. д.

Излишек в пятой пробирке отсасывается и выливается в чашку. В результате получается разведение кратное 2, 4, 8, 16, 32.

В каждую из пробирок вносят затем по 0,5 рабочего реактива и осторожно смешивают. При наличии билирубина получается розовое окрашивание. Концом реакции считается разведение, в котором едва различимо розовое окрашивание.

Если окрашивание не наступило в течение 15 минут, в пробирки добавляют спирт. Помутневшая вследствие осаждения белка жидкость при наличии билирубина окрашивается в розовато-малиновый цвет.

Чтобы лучше заметить в мутной жидкости изменение цвета, рекомендуется добавить по 0,5 мл эфира и рассматривать на белом фоне. Разница между бесцветным слоем эфира и окрашенной испытуемой жидкостью выступает очень отчетливо.

Умножив разведение на 0,016, устанавливают количество билирубина в 1 мл. Умножением на 100 получают количество билирубина в миллиграммах на 100 мл сыворотки.

Методом Бакальчука можно определить, кроме количества билирубина, разновидность его. Появление окрашивания после добавления рабочего реактива говорит в пользу билирубина, проведенного через печень (прямая реакция) изменение цвета после добавления спирта свидетельствует о наличии билирубина, не проведенного через печень (непрямая реакция).

Метод Херцфельда. В качестве реактива используется смесь 19 частей 25%-ной соляной кислоты и 1 часть 25%-ной азотной кислоты. Этот основной раствор отличается стойкостью и хорошо сохраняется в продолжение длительного времени.

Перед постановкой опыта каждый раз готовят рабочий реактив, состоящий из 1 части реактива и 4 частей 96° спирта.

Для определения билирубина берут шесть пробирок. В первую пробирку наливают 1 мл испытуемой сыворотки, а в остальные пять—по 0,5 мл физиологического раствора. Затем 0,5 мл сыворотки из первой пробирки переносят во вторую.

Перемешав жидкость, отстаивают 0,5 мм смеси и переносят в третью и т. д.

Излишек в 0,5 мл в последней пробирке отстаивается и удаляется, Приготовив таким образом ряд разведений, в каждую пробирку вносят по 0,5 мл рабочего реактива.

При наличии билирубина получается окрашивание жидкости в зеленый цвет, который постепенно теряет свою интенсивность по мере разведения сыворотки. Конечная реакция дает еле заметное зеленое окрашивание. Умножая степень разведения на 0,016, получают количество билирубина в 1 мл сыворотки.

Метод Синева. Стандарт Синева (двухромовокислый калий 0,1, серная кислота 3,0 и дистиллированная вода 200,0), соответствующий по своей окраске слабожелтому оттенку сыворотки лошади, принимается за единицу. Исследование производится в штативе. Рядом с пробиркой, содержащей стандарт, помещается пробирка с 0,5 мл испытуемой сыворотки.

Затем при помощи градуированной пипетки в испытуемую сыворотку добавляют по 0,5 мл 30%-ного раствора поваренной соли до тех пор, пока окраска не будет соответствовать цвету стандарта. Количество билирубина определяется по формуле: 0,5 +Х=Количеству билирубиновых единиц.

В нормальной сыворотке цвет соответствует стандарту и не требует разведения, а потому количество билирубина по этой формуле будет равняться 0,5+0,5=1,0.

Количество билирубина в сыворотке крови здоровой лошади (в мг на 100 мл), определенное колориметрическим методом, по данным отдельных авторов, колеблется в следующих пределах.

По Хрусталеву 0,37—3,0, среднее 1,09;
по Синеву 0,3 —1,0, среднее 0,8;

По Симонову 0,19—1,09, среднее — 0,64.

билирубина в сыворотке значительно повышается при инфлюэнце, крупозной и гриппозной пневмонии, мыте и некоторых других заболеваниях.

Наиболее высокие цифры отмечаются при кровепятнистой болезни, отравлении S02 и хвощом, когда количество билирубина повышается до 4 мг. Максимальные изменения обнаружены при энцефаломиэлите лошадей (8—12 мг на 100 мл сыворотки).

Значительные билирубинемии отмечаются при большом количестве заболеваний, имеющих совершенно различную клиническую картину, а потому могут быть с успехом использованы в дифференциации процессов и для прогноза.

Источник: veterinarua.ru

Источник: //presidentofrussia.ru/opredelenie-bilirubina-po-iendrashiku/

ТерриторияЗдоровья
Добавить комментарий